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REF DF91A
Dimension® clinical chemistry system
Flex® reagent cartridge
Cartucho de reagente Flex® para Despiste de
a. Os poços são numerados consecutivamente a partir da extremidade larga do ANFetamina/Metanfetamina na Urina
b. O anticorpo e o conjugado são um par correspondente. A titulação do Fim a que se destina: O cartucho de reagente Flex® para AMPH utilizado
anticorpo e a actividade do conjugado enzimático podem variar de lote paralote.
no sistema de química clínica Dimension® fornece reagentes para um teste de diagnóstico in vitro destinado à determinação qualitativa e semi-quantitativa de anfetaminas na urina humana. As leituras obtidas com o Precauções: As cuvetes utilizadas contêm líquidos biológicos humanos;
método da AMPH são utilizadas no diagnóstico e tratamento do consumo manipular com o devido cuidado para evitar o contacto com a pele ou a
ingestão.
O método AMPH fornece apenas um resultado preliminar analítico.
Para utilização em diagnóstico in vitro Deve ser utilizado um método químico alternativo com maior
Preparação do reagente: Todos os reagentes são líquidos e estão prontos
especificidade, de forma a obter um resultado analítico confirmado. O
método de confirmação aconcelhado é a cromatografia gasosa/
Instruções para armazenamento: Armazenar entre 2 e 8 °C.
espectrometria de massa (CG/EM).1,2 Encontram-se disponíveis outros
Validade: Consultar a embalagem para obter a data de validade do
métodos de confirmação química. A consideração clínica e a avaliação
cartucho de reagente não aberto individual. Os reagentes dos cartuchos profissional deverão ser utilizadas em qualquer resultado do teste de
selados permanecerão estáveis durante 30 dias. Depois de um poço ter droga de abuso, particularmente quando são utilizados resultados
sido perfurado pelo instrumento, permanecerá estável durante 2 dias.
positivos preliminares.
Colheita de amostra:1,2,3 Para as amostras analisadas com o cartucho de
As anfetaminas são substâncias estimuladoras do sistema nevoso central reagente Flex® para AMPH podem ser utilizados os procedimentos que produzem um estado de alerta, aumento da energia, redução da fome e uma sensação geral de bem-estar. O termo “anfetamina” inclui váriosfármacos mas a d-anfetamina, a d-metanfetamina (o derivado N-metil da • A colheita das amostras de urina deve ser executada em recipientes limpos, anfetamina), e a d,1-anfetamina são os mais comuns1. As anfetaminas inquebráveis e estanques. Devem ser utilizadas amostras de urina colhidasrecentemente. Se não forem imediatamente analisadas, as amostras deverão podem ser ingeridas por via oral, intravenosamente, por fumo ou ser refrigeradas durante um período inferior a 24 horas. Se for necessário um armazenamento superior a 24 horas, as amostras deverão ser congeladas.
As anfetaminas são facilmente absorvidas pelo tracto gastrointestinal e • As amostras de urina colhidas recentemente não necessitam de nenhum pré- depois são desactivadas no fígado ou eliminadas inalteradas pela urina. A importância relativa destes modos de eliminação depende do pH urinário.
• Poderão existir amostras que exibam turvação. Recomenda-se a A anfetamina é metabolizada em metabolitos desaminados (ácidos centrifugação dessas amostras, antes de serem analisadas.
hipoúricos e bonzóicos) e hidroxilados. A metanfetamina é parcialmente • Não são necessários quaisquer aditivos nem conservantes.
metabolizada em anfetamina, o seu metabolito principal.1 • O ácido bórico não deve ser utilizado como um conservante.
As anfetaminas aparecem na urina após três horas de qualquer tipo de • As amostras deverão ter um valor de pH entre 5 e 8. As amostras com um administração1, e podem ser detectadas por este ensaio Emit® durante até valor de pH fora deste intervalo deverão ser ajustadas para este intervalo através da adição de 1N de HCl ou de 1N de NaOH, antes da análise.
• Antes da análise, as amostras deverão estar a uma temperatura de Resumo: O cartucho de reagente Flex® para AMPH contém os reagentes
Emit® II Plus1. O cartucho AMPH é utilizado no sistema Dimension® para • A adulteração da amostra de urina poderá originar resultados erróneos. Se fornecer uma aplicação automática deste ensaio. Baseia-se na competição houver suspeita de adulteração, efectuar a colheita de uma amostra recente.
para os locais de ligação dos anticorpos entre o fármaco presente na • As amostras de urina humanas deverão ser manipuladas e tratadas como se amostra e o fármaco marcado com a enzima glucose-6-fosfato Concentração de compostos mostrando
Emit® é uma marca comercial registada da Syva Company - Dade Behring Inc.
resultados AMPH negativos no “Cutoff” de 1000 ng/ml
Princípios do procedimento: Os lotes correspondentes dos anticorpos
Cada um dos seguintes compostos foi adicionado a uma amostra de urina monoclonais reactivos à d-anfetamina e à d-metanfetamina marcadas com sem fármaco e forneceu resultados de AMPH negativos com um “Cutoff” a glucose-6-fosfato desidrogenase são utilizados nesta metodologia Syva Emit® II Plus. A sequência da reacção é a seguinte: Composto
Concentração
Ac+ AMPH + AMPH- ———> Ac-AMPH + Ab-AMPH-G6PDH + AMPH- G6PDH (inhibida) G6PDH Glucose-6- + NAD+ ————> 6-fosfogluconolactona + NADH + H+ AMPH-G6PDH = d-anfetamina e d-metanfetamina- conjugado glicose-6-fosfato desidrogenase A concentração da droga na amostra determina a quantidade do conjugado AMPH-glucose-6-fosfato desidrogenase (AMPH-G6PDH) que está ligada ao anticorpo. O conjugado não ligado catalisa a oxidação da glucose-6-fosfato com a redução simultânea do NAD+ para NADH, mais rapidamente do que o conjugado ligado. A velocidade de aumento da absorvância a 340 nm devido ao aumento do NADH está relacionada com a concentração da droga presente na amostra através de uma função 2-Etilideno-1,5-dimetil-3,3-difenilpirrolidina (EDDP) Reagentes
Ingrediente
Concentraçãonb
Materiais necessários:
Cartucho de reagente Flex® para AMPH, N° de Cat. DF91A Catálogo do Calibrador de Nível 0 Syva Emit® 9A509UL Catálogo do Calibrador de Nível 2 Syva Emit®9A549UL Catálogo do Calibrador de Nível 3 Syva Emit®9A569UL Catálogo do Calibrador de Nível 5 Syva Emit®9A609UL Aminas simpatomiméticas
Procedimento: Para a execução do teste de AMPH é necessário o cartucho
de reagente Flex® para AMPH, No. de Catálogo DF91A. Este teste é efectuado automaticamente no sistema de química clínica Dimension®, depois de o método ter sido calibrado (consultar o Material de Referência Teste de Interferências
na secção Calibração, em baixo).
Cada um dos seguintes compostos foi adicionado à urina numa Passos do teste
concentração de +/- 25 % do “cutoff”, não produzindo uma resposta falsarelativamente ao “cutoff” de 1000 ng/ml: A recolha da amostra, dispensação do reagente, agitação, processamento eimpressão dos resultados são realizados automaticamente pelo sistemaDimension®. Para obter pormenores sobre este processamento, consultar Composto
Concentração
NOTA: Os copos de amostra deverão ser enchidos com 1.0 ml de
amostra, controlo ou calibrador, utilizando uma pipeta automática. Não
devem ser utilizadas pipetas de distribuição plásticas. Isto ajuda a
manter uma razão superfície do copo/volume da amostra constante, e
minimiza a perda de fármaco da amostra devido à aderência dos
fármacos à superfície do copo.
Condiçãoes de teste
Especificidade: Na tabela seguinte são apresentados os compostos
Volume do reagente 1 (Anticorpo,NAD,G6P): detectados por este ensaio e os níveis nos quais esses compostos têm Volume do reagente 2 (conjugado enzimático): uma resposta aproximadamente equivalente à do “cutoff” de 1000 ng/ml de d-metanfetamina. Cada concentração representa o nível de reactividade para o composto referido, quando é adicionado a uma amostra de urina negativa. Se uma amostra contém mais do que um composto detectado pelo ensaio, pode ocorrer a combinação de concentrações inferiores às referidas abaixo para produzir uma taxa aproximadamente equivalente ou Calibração
superior à do calibrador “cutoff”.
Quando se calibrar o método da AMPH, deverão ser tomadas em Concentrações de anfetaminas que produzem um resultado
consideração as seguintes informações: aproximadamente equivalente a 1000 ng/ml da d-metanfetamina
Composto
Concentração
*SAMHSA - Substance Abuse Mental Health Services Administration Catálogo do Calibrador de Nível 3 Syva Emit® Catálogo do Calibrador de Nível 0 Syva Emit® 9A509UL Modo semi-quantitativo: 0 ng/ml d-metanfetamina Catálogo do Calibrador de Nível 2 Syva Emit® 9A549UL500 ng/ml d-metanfetamina Concentrações (µg/ml) de compostos que produzem um resultado
Catálogo do Calibrador de Nível 3 Syva Emit® 9A569UL aproximadamente equivalente ao “cutoff” de 1000 ng/ml da
d-metanfetamina
Catálogo do Calibrador de Nível 5 Syva Emit® 9A609UL2000 ng/mld-metanfetamina Composto
Concentração
Validar a calibração através do teste de um controlo Modo semi-quantitativo: 0,500,1000 (Nível de “cutoff”), and 2000 ng/ml Validar a calibração através do teste de um controlo Nível de “cutoff” (1000 ng/ml) em triplicado Modo semi-quantitativo: Níveis 0,500,1000, and 2000 ng/ml em duplicado Frequência da calibração: Cada lote novo de cartucho de reagente. Cada 30 dias para A benzfetamina metaboliza em anfetamina e metanfetamina.
** A selegilina, um medicamento receitado para o tratamento da doença de Parkinson, metaboliza em I-anfetamina e I-metanfetamina. O doentes quetomem selegilina podem portanto obter testes positivos nos ensaios da Controlo de qualidade
anfetamina. Nota : As amostras provenientes de doentes que tomemclorpromzaína (Thorazine®) podem obter resultados positivos com este Pelo menos uma vez em cada dia de utilização, analisar um controlo positivo e um controlo negativo relativamente à concentração “cutoff”,utilizando um material de controlo à base de urina adequado. Se osresultados se situarem fora dos limites aceitáveis em laboratório, seguir oprocedimento da resolução de problemas apresentado no manual dosistema Dimension®. Pode existir uma avaria do sistema se for observadaa seguinte precisão de 5 testes: Concentração
Desvio Padrão % CV
Resultados:
Resumo dos resultados dos doentes
Modo qualitativo: Os resultados obtidos numa análise de AMPH podem ser
Foram testadas 228 amostras de urina nativas com o cartucho Flex® para referidos qualitativamente como negativos ou positivos, relativamente ao
AMPH no sistema Dimension® (“cutoff” de 1000 ng/ml) e com o método “cutoff” de 1000 ng/ml para AMPH. Os resultados positivos indicam que,
AMPH no Sistema Abbott AxSYM® (“cutoff” de 1000 ng/ml). As amostras provavelmente, a amostra contém anfetaminas. Os resultados negativos
com resultados positivos em qualquer método foram analisadas por CG/ indicam que a amostra não contém anfetaminas ou que as anfetaminas estão presentes em concentrações inferiores ao nível “cutoff” de 1000 ng/ml.
Sistema Abbott AxSYM®
Modo semi-quantitativo: Os resultados de uma análise AMPH podem ser
(“Cutoff” de 1000 ng/ml)
referidos semi-quantitativamente com um resultado expresso numa concentração com unidade numérica (ng/ml) seguido por uma designação Cartucho de reagente
negativa ou positiva. O resultado da concentração em ng/ml representa,
Flex® para AMPH
aproximadamente, a concentração cumulativa dos fármacos detectados pela sistema de química
análise de AMPH. O resultado numérico pode ser utilizado para a semi- clínica Dimension®
quantificação da amostra, para a monitorização com precisão e para a (“Cutoff” de 1000 ng/ml)
calibração. Os resultados semi-quantitativos em ng/ml são equivalentes à concentração do fármaco apenas quando a amostra é um padrão contendo (“Cutoff” de 500 ng/ml anfetamina ou
500 ng/ml metanfetamina e
Os resultados de AMPH superiores ou iguais a 1000 ng/ml devem ser 200 ng/ml anfetamina)
referidos como positivos. Os resultados de AMPH inferiores a 1000 ng/ml
devem ser referidos como negativos. Os resultados inferiores ao “cutoff”
Cartucho de reagente
numérico indicam que não existem anfetaminas na amostra ou que as Flex® para AMPH
anfetaminas estão presentes em concentrações inferiores ao nível “cutoff” sistema de química
clínica Dimension®
(“Cutoff” de 1000 ng/ml)
*Limitações do procedimento:
• Resultados NEGATIVOS para amostras com concentrações abaixo do
Amostras com resultados discrepantes (ng/ml):
intervalo do ensaio podem ser acompanhadas por uma mensagem “intervalo do ensaio” ou “abaixo do intervalo do ensaio”. Estes resultados devem ser
registados como NEGATIVOS.
• Resultados POSITIVOS para amostras com concentrações acima do intervalo
do ensaio podem ser acompanhadas por uma mensagem “intervalo do ensaio” ou “acima do intervalo do ensaio”. Estes resultados devem ser registados como POSITIVOS.
• Um resultado positivo do ensaio indica a provável presença de anfetaminas, mas não indica nem mede o nível de intoxicação.
• A presença de anfetaminas na urina é apenas uma indicação da exposição recente às anfetaminas ou do consumo de anfetaminas.
• Os efeitos psicológicos e fisiológicos das anfetaminas não estão Especificidade analítica
necessariamente relacionados com a concentração urinária.
Consultar a secção “Concentração de compostos mostrando resultados • Um resultado AMPH positivo indica a provável presença do fármaco e dos AMPH negativos no “Cutoff” de 1000 ng/ml” seus metabolitos. O método AMPH não consegue quantificar totalmente aconcentração dos componentes individuais.
Sensibilidade analítica
• A interpretação dos resultados deve considerar que as concentrações de urina A sensibilidade do método AMPH é de 500 ng/ml, valor que representa a variam muito com a ingestão de líquidos e com outras variáveis biológicas.
menor concentração de AMPH que pode ser distinguida do zero. Esta • Auto-diluição (AD): Esta característica encontra-se apenas disponível para as sensibilidade é definida como a concentração dois desvios padrão acima do amostras testadas no modo semi-quantitativo. Consultar o manual do sistema Calibrador de Nível 0 Emit® 0.0 ng/ml (n=20).
Bibliografia
• Existe a possibilidade de outras substâncias e/ou outros factores não referidos 1. Emit® II Plus Amphetamine/Methamphetamine Assay Package Insert Sheet, em cima poderem interferir com o teste e produzirem resultados falsos, por exemplo erros técnicos ou de procedimento.
2. Hawks, RL, Chiang, CN, Urine testing for drugs of abuse, NIDA Research • O sistema de emissão de relatórios do instrumento contém mensagens de Monograph 73, U.S. Government Printing Office, Washington, DC erro para prevenir o operador de avarias específicas. Qualquer relatório que contenha tais mensagens de erro deve ser retido para seguimento. Consultar o 3. Burtis CA, Ashwood ER. TietzTextbook of Clinical Chemistry, W.B. Saunders Co., Philadelphia, PA 1999,Third edition pp 39–41 (Biological Hazards),pp 1191-1193 (Drugs of Abuse).
Características específicas de desempenhod
4. Baselt RC, Cravey RH. Disposition of Toxic Drugs and Chemicals in Man. 4th Reprodutibilidadee
ed. Chemical Toxicology Institute; Foster City, California,1995:450.
Dimension® e Flex® são marcas registadas da Dade Behring Inc., no Intra-ensaio
Gabinete de Patentes e Marcas Registadas dos E.U., na Alemanha e em Material
Desvio Padrão
Desvio Padrão %CV
* As secções revistas são anotadas com um asterisco.
Chave dos Símbolos
0800-170417
SAC - Serviço de Atendimento ao Cliente
sac/brazil@dadebehring.com
d. Todos os testes de características de desempenho foram efectuados após a Importado e distribuído por
realização das verificações normalmente recomendadas do controlo de DADE BEHRING LTDA.
qualidade do equipamento (consultar o manual do sistema Dimension®).
Rua Geraldo Flausino Gomes, 61 - 1º Andar e. Os controlos foram analisados em duplicado durante 20 dias. Os coeficientes Brooklin - São Paulo - SP - CEP 04575-060 de variação intra-ensaio e os coeficientes totais (%CV) foram calculados Dispositivo Médico para Diagnóstico In Vitro através do método da análise da variância, de acordo com a Norma EP5-A do Comité Nacional de Padrões Laboratoriais Clínicos (National Committee of Clinical Laboratory Standards) (NCCLS) (Fevereiro de 1999).
A data em “Utilizar antes de” encontra-se no Dade Behring Limited
Walton Manor, Walton
Dade Behring Inc.

Source: http://www.medcorp.com.br/medcorp/upload/downloads/Reagente%20ANFETAMINA%20-METANFETAMINA-AMPH-%20Flex_2006531082.pdf